MODULO 2: INGEGNERIA GENETICA.
Clonaggio molecolare: enzimi di restrizione e modificazione. Retrotrascrizione-PCR. Vettori di clonaggio. Sistemi di espressione: studio della funzione dei geni e produzione di proteine ricombinanti: Sistemi di espressione procariotici, eucariotici: Lievito (S. cerevisiae e P. pastoris); cellule di insetto; drosophila melanogaster; cellule di mammifero in coltura; Animali transgenici: la ricombinazione omologa e sito-specifica; Topi knockout, Topi knockin, topi knockdout condizionali; Piante transgeniche. Interferenza dell'RNA: principi e applicazioni. Tecniche per l’analisi del trascrittoma: Northern, Ibridazione in situ, analisi quantitative dell’espressione di un singolo o multipli geni mediante Real-Time PCR. Microarrays.